Публикации участников конференции

Англо-русскоязычный научный химический журнал
"БУТЛЕРОВСКИЕ СООБЩЕНИЯ"
Русский | English

Сведения о статье:

Быстров И. А. , Лебеда М. В. , Хлудин А. С., Пушкарев М. А. Разработка протокола анализа органических кислот в культуральной жидкости Coprinopsis cinerea методом капиллярного электрофореза

Данные о статье:
Название статьи:	Разработка протокола анализа органических кислот в культуральной жидкости Coprinopsis cinerea методом капиллярного электрофореза
Все авторы публикации в порядке следования:	Быстров И. А. , Лебеда М. В. , Хлудин А. С., Пушкарев М. А.
Аннотация:	Coprinopsis cinerea – модельный базидиомицет, широко применяемый для изучения морфогенеза и полового размножения у гомобазидиомицетов. Он характеризуется коротким жизненным циклом и способностью к стабильному культивированию в лабораторных условиях на синтетических питательных средах, что делает данный гриб перспективным объектом в области биотехнологии. C. cinerea продуцирует ряд биологически активных соединений, включая лакказы, коллагеназу и пептидный антибиотик копсин, а также рассматривается как потенциальный агент для биоремедиации и переработки лигноцеллюлозного сырья. Мониторинг метаболической активности культуры с помощью анализа низкомолекулярных метаболитов, в частности органических кислот, позволяет оценивать физиологическое состояние клеток и оптимизировать условия культивирования. Метод капиллярного электрофореза представляет собой эффективный аналитический инструмент для этих целей благодаря высокой чувствительности, экологичности и низкому расходу реактивов. Целью настоящего исследования являлась разработка лабораторного протокола количественного анализа органических кислот в культуральной жидкости C. cinerea методом капиллярного электрофореза. В качестве основы использована методика М 04-47-2012, регламентирующая анализ органических кислот в продукции пищевой промышленности. Оценена её применимость к сложной биологической матрице, характерной для культуральной жидкости микроскопических грибов. Экспериментально апробированы различные подходы к пробоподготовке: осаждение белков метанолом и трихлоруксусной кислотой, а также ультрафильтрация. Установлено, что ультрафильтрация обеспечивает наилучшую воспроизводимость результатов и минимизирует влияние матричных эффектов без существенной потери информативности электрофореграмм. Разработанный протокол включает последовательную фильтрацию культуральной жидкости, ультрафильтрацию с использованием мембранного модуля с отсечкой 50 кДа, десятикратное разведение фильтрата и последующий анализ методом капиллярного электрофореза. Предложенный аналитический подход позволяет достоверно определять щавелевую, муравьиную, яблоч-ную, лимонную, молочную и уксусную кислоты в культуральной жидкости Coprinopsis cinerea, обеспечивая достаточную чувствительность и воспроизводимость. Полученные данные могут быть использованы для монито-ринга физиологического состояния культуры и оптимизации биотехнологических процессов её культивирования.
ROI:	jbc-01/25-83-7-57
Ключевые слова:	капиллярный электрофорез, Coprinopsis sp., Coprinopsis cinerea, культуральная жидкость, органические кислоты, пробоподготовка, ультрафильтрация
Общий форум статьи:	Смотреть форум
Шапка статьи в pdf:	Скачать [размер файла: 227кб.] Дата: 11.10.2025 5:36:21
Комментарий: